分泌型细胞因子如何检测发挥作用

Q：多因子实验还用的样本类型有可些?A：Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）、FluidPeritonealFluid（腹腔液）等等。Q：多因子实验中血清好检测，还是血浆好检测?A：文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验，具体需研究者根据自己实际条件选择。Q：为什么要做预实验?A：试剂说明书中的样本稀释比例不精确，需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例，让尽可能多的因子在检测范围内，从而提高检出率。2.避免样本浓度过高，导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q：血清血聚溶血，对实验结果有形响吗?A：肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的，轻微溶血都是可以接受，但从溶血的严重程度看区别较大，样本普遍存在些许溶血情况，从目前文献上看没有明确的数据支持。细胞因子检测是一个强大的工具，通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。分泌型细胞因子如何检测发挥作用

Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号，构建标准曲线，还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA，特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本，许多研究人员在日常实验研究（例如动物实验、细胞实验）中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测，用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告！msd多因子检测方法LabEx提供高通量蛋白组学（Olink）服务！

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。

酶联免疫斑点技术（Elispot）技术优势(1)单细胞水平，活细胞功能检测：弥补了体液中CK半衰期短的不足，当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济，可以进行高通量筛选：既可检测自发分泌细胞，又可检测抗原特异性CK分泌细胞，具有较高特异性，并可观察药物治疗反应，且使对CSF中T、B细胞研究成为可能，对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。LabEx 免疫组化平台：包埋，切片，染色，多重荧光组化，以及病理分析（HALO）。

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少（25~60μL/孔），检测指标多，可兼容血清/血浆，细胞上清，细胞/组织裂解液，脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高（部分panel可达到亚fg/ml），宽线性范围（达到6个log），具有高重复性（板内CV

流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。分泌型细胞因子如何检测发挥作用

抗体芯片介绍:ELISA原理的高通量WB，单一样品多种分析物的检测。具有微型化、集成化、高通量的特点，可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度，目前主要用于信号转导、蛋白组学、肿块物及其他疾病的相关研究。R&D的多因子固相抗体芯片•每个试剂盒可检测4个样本，每个样本可同时检测多达119个分析物，实验可在一日内完成•每个试剂盒提供4张膜，膜上监测点以复孔的形式包被捕获抗体和对照抗体•该即用型试剂盒包含抗体膜，检测抗体和缓冲液等所有组分优势和特点•使用方便，节省时间和成本•无需专门设备•高通量：1天所得到的数据相当于免疫印迹几周所得数据•样本类型多样化•每种试剂盒均验证过多种样本，如细胞裂解液，组织裂解液，细胞培养上清，血清，血浆，唾液，尿液或牛奶等•节省样本•获取相同数据点所需样本量远低于WB•比竞争对手抗体芯片所需样本量更少，获得的数据更多LabEx提供28种抗体芯片，用于人，小鼠和大鼠物种的蛋白检测相关服务,我们为您提供完整的实验结果报告，包括数据分析结果，原始数据文件，实验protocol等。分泌型细胞因子如何检测发挥作用

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